Методы диагностики болезней рыб

Предупреждение массовой гибели рыб и правильная организация лечебных мероприятий возможны только после установления причины болезней, т. е. после постановки диагноза. Диагноз на заболевание рыб ставят на основании эпизоотологического, клинического, патологоанатомического, паразитологического, а в случае необходимости микробиологического или токсикологического исследования, которые проводят в специализированных лабораториях научно-исследовательских институтов или ветеринарно-санитарных станций.

Эпизоотологическими сследованием называется сбор и анализ данных о начале и характере течения заболевания, видовом составе и численности (плотности посадки) рыб; размерах и характере водоёма, особенностях его водоснабжения: солевом, газовом и термическом режиме; характере зарастаемости водоёма надводной жёсткой и подводной мягкой растительностью; характеристике естественной кормовой базы (данные о количестве и видовом составе планктона и бентоса), составе и качестве комбинированных кормов при искусственном кормлении; способах, сроках и количестве внесения удобрений; а также выявление источника заражения и т. п.

Эпизоотологическое исследование проводят путём опроса ихтиологов или рыбоводов и по ветеринарной отчетности о состоянии обследуемого водоёма (или хозяйства) за предыдущие годы.

Клиническим исследованием называется внешний осмотр живой или недавно уснувшей рыбы и описание признаков заболевания. Клиническому осмотру подвергают по возможности не менее 100 рыб каждого вида, обитающего в обследуемом водоёме. При этом отмечают также отклонения в поведении рыб, характере дыхания, реакции на внешние раздражения. При внешнем осмотре обращают внимание на форму тела, окраску, количество слизи, наличие каких-либо повреждений, уродств, язв, опухолей и т. д., а также паразитов, видимых невооруженным глазом. Клиническое исследование помогает определить направление дальнейших лабораторных исследований.

Патологоанатомическим исследованием называется вскрытие и внешний осмотр внутренних органов, а также срезов этих органов у живой или недавно уснувшей рыбы и описание патологических признаков. Количество рыб, взятых для этой цели, зависит от возраста и колеблется от 5-10 (производители и ремонт) до 15—25 (рыбы младших возрастных групп) экз. Вскрытие рыбы проводят осторожно, чтобы не повредить внутренних органов. При этом исследуют состояние скелетной мускулатуры, брюшной полости и внутренних органов. Обращают внимание на наличие в брюшной полости газов, жидкости различного происхождения, спаек, опухолей; изменение окраски и размеров различных внутренних органов, а также наличие цист паразитов или личинок гельминтов. Внутренние органы извлекают из брюшной полости, осторожно отделяют друг от друга и осматривают в следующем порядке: печень, желчный пузырь, селезёнка, желудочно-кишечный тракт, половые железы, плавательный пузырь, почки, мочевой пузырь, сердце. Кроме того, извлекают глаза и вскрывают черепную коробку для осмотра головного мозга. Поражённые органы (или кусочки) помещают в банки с фиксатором (70%-ный этиловый спирт или 4%-ный формалин), сопровождая этикеткой с указанием вида и возраста рыбы, названием органа, указанием времени и места вылова рыбы. В некоторых случаях при патологоанатомическом исследовании берут материал для гистологического исследования.

Гистологическим исследованием называется выявление специфических изменений или микроорганизмов на специально окрашенных и обработанных срезах органов и тканей больной рыбы. Эти исследования представляют собой серию последовательных операции, связанных с фиксацией анализируемого материала, заливкой его в различные среды (приготовление блоков), приготовлением срезов из блоков на микротоме (специальный прибор с острым ножом), окрашиванием по специальной методике срезов, наклеенных на предметное стекло.

Гистологические исследования применяют для подтверждения диагноза в сомнительных случаях (цероидная дегенерация печени, миксоспоридиоз и др.), при смешанных заболеваниях, а также для выявления возбудителей, которые трудно обнаружить при обычной микроскопии (вертеж форели, кокцидиоз и др.). Для гистологических исследований мелких рыб (мальков) после вскрытия брюшной полости фиксируют целиком, а от крупных рыб берут органы или кусочки органов размером 2ХЗХ1 см. Фиксацию материала производят в широкогорлых стеклянных банках в 10%-ном формалине или в 70—96%-иом спирте, снабжая его соответствующей этикеткой.

Паразитологическим исследованием называется просмотр давленых препаратов (или соскобов) различных органов свежей рыбы, а также сбор и определение паразитов. Для правильной постановки диагноза применяют полное паразитологическое вскрытие рыбы по методике, разработанной К. И. Скрябиным (1923) и модифицированной применительно к рыбам В. А. Догелем, Э. М. Ляйманом и А. П. Маркевичем. Количество исследуемых рыб колеблется от 10 до 25 экз. в зависимости от возраста. Рыбу для исследования следует вылавливать из разных участков водоёма. Полное паразитологическое исследование проводят в определённом порядке и начинают с внешнего осмотра рыбы. При этом собирают и фиксируют для последующего изучения всех паразитов, видимых невооружённым глазом (нематод, пиявок, рачков).

Далее исследуют под микроскопом мазки из соскобов слизи, снятой с поверхности тела и плавников. После взвешивания и измерения рыбы берут кровь из сердца или хвостовой артерии, делают мазок на предметном стекле, который позднее окрашивают и просматривают под микроскопом для обнаружения кровепаразитов. Позднее вырезают и исследуют жабры, извлекают и просматривают слизь из носовых полостей. Брюшную полость вскрывают, как при патологоанатомическом исследовании. Методика исследования печени, селезенки, почек одинакова. Вначале эти органы осматривают невооружённым глазом и собирают крупных паразитов, капсулы с личинками, цисты с миксоспоридиями. Для обнаружения более мелких паразитов весь, орган или небольшой кусочек давят между стёклами и просматривают под микроскопом.

При исследовании жёлчного и мочевого пузырей особенно тщательно рассматривают их содержимое. У плавательного пузыря исследуют стенки. Яичники и семенники сдавливают между двумя предметными стеклами и просматривают при малом и большом увеличении микроскопа. Желудочно-кишечный тракт извлекают целиком, расправляют и вскрывают ножницами, начиная с пищевода. Крупных паразитов (гельминтов) извлекают, отмывают в физиологическом растворе или воде, а затем фиксируют. Из различных отделов, кишечника делают соскоб со слизистой оболочки и исследуют под микроскопом. При исследовании глаз их извлекают целиком из глазниц, вскрывают и просматривают хрусталик и стекловидное тело, раздавив их между предметными стёклами. Головной мозг извлекают целиком после вскрытия черепной коробки. Часть его просматривают под микроскопом, а остальную часть - компрессионным способом (раздавив между предметными стеклами) под лупой. Спинной мозг предварительно извлекают из позвоночника и просматривают, как головной.

Перед просмотром мускулатуры сначала снимают и исследуют внутреннюю поверхность кожи, а затем вырезают тонкие пластинки мускулатуры и просматривают компрессионным способом под лупой, а измельченные кусочки - под микроскопом. При подозрении на вертеж для обнаружения спор возбудителя заболевания у форели исследуют хрящевые ткани, для чего измельчают голову и образовавшуюся массу, обильно смоченную водой, небольшими порциями просматривают под микроскопом при большом увеличении. Материал, собранный при паразитологическом исследовании, фиксируют различными способами и обязательно снабжают этикеткой. Способы фиксации паразитов различных групп и приготовления из них микропрепаратов указаны в специальных практических руководствах.

Микробиологическими исследованиями называются работы по изучению микроорганизмов - вирусов, бактерий, грибов - возбудителей инфекционных заболеваний. Их проводят лишь при явном подозрении на инфекционное заболевание после проведения эпизоотологического, клинического, патолого-анатомического, паразитологического и токсикологического исследований. Микробиологические исследования состоят из ряда работ, направленных на выделение от рыб возбудителя инфекции, культивирование (выращивание) его в условиях лаборатории на специальных питательных средах, изучение различных морфологических, биохимических, патогенных и других свойств выделенного возбудителя и определение его родовой и видовой принадлежности.

Для проведения вирусологических, бактериологических или микологических исследований больных или подозрительных по заболеванию рыб доставляют в ветеринарную лабораторию живыми. Для исследования 10—15 рыб с явно выраженными клиническими признаками перевозят в молочных бидонах, ваннах или других ёмкостях, заполненных водой из неблагополучного водоёма. В случае невозможности перевозки живой рыбы кусочки органов и тканей больной рыбы помещают в стерильную стеклянную посуду с 40%-ным водным раствором глицерина, заливают пробку парафином и доставляют в лабораторию.

Токсикологическими исследованиями называются химико-аналитические работы для установления вида и количества ядовитого вещества в гидробионтах, воде и почве. Токсикологические исследования проводят при явном подозрении на отравление рыб ядами. Предварительно собирают и анализируют эпизоотологические, клинические, патологоанатомические и паразитологические данные.

Для токсикологических исследований в ветеринарную лабораторию доставляют живую или недавно уснувшую рыбу (не менее 5 экз.), пробы воды, взятые в зоне гибели рыб и в благополучном участке (в каждой пробе не менее 1 л), пробы грунта из разных зон водоема, высушенные и растертые (каждая проба не менее 1 кг), пробы бентоса, фиксированные в 70%-ном спирте (не менее 100—.150 г живой массы), пробы фито- и зоопланктона, фиксированные аналогично бентосу. Весь собранный материал упаковывают в соответствующую тару, опечатывают, снабжая этикетками, и высылают в соответствующее; учреждение, одновременно с актом обследования водоёма и сопроводительным письмом. После всесторонних диагностических исследований устанавливают причину болезни и организуют соответствующие противоэпизоотические мероприятия.